大鼠apelin  12 （ELISA）試劑盒

預防措施

ELISA試劑盒檢測時的注意事項

1. ELISA 實驗的一般規則

1、為保證移液槍的準確性，誤差不能超過2%。可用水和電子天平測定。但最好請專業人士糾正。

2、可配20ul、50ul、100ul、1000ul各一支槍。吸出不同的液體后，更換移液器吸頭。即使在吸氣標準時。

3. 實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，讓所有試劑回到室溫，使結果更穩定。

4. 實驗過程中，基板應避光。

5、用槍吸液體時，速度不能太快，以免產生氣泡，吸不準。

6、吸液時，請使用范圍接近所需量的槍，以減少誤差。

7、在酶標孔中加入液體時，避免吸頭與孔內液體接觸，使吸頭上的液滴與孔壁接觸，液滴自然流下。

8. 加完所有液體后，平行輕輕搖動桌面上的ELISA板30秒，使液體混合。也可以使用酶標儀的搖動功能。

9. 溫水浴時，用不干膠或膠帶紙將ELISA板密封，防止水分蒸發。

10、洗板時，每次加入洗劑后，應靜置1分鐘，使清洗更*。如果沒有洗板機，請在除去液體后在報紙或羊毛紙上將盤子拍干。

11、當洗液不夠時，可用蒸餾水配制PH7.4，0.02M磷酸鹽緩沖液，加入0.1% Tween 20作為洗液。加入1/1000的后可長期保存。

12、基材對光敏感，使用前應立即準備。

13、檢測前，打開酶標儀，使其穩定10分鐘以上。

14、底物有一定毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免。

15、待測樣品應澄清，否則會影響結果。

16、溫水浴時間應符合試劑盒規定。

17、盡量做雙孔實驗，以保證數據的準確性。

18、結果有問題的樣品，應采用其他方法確認。

可以總結為四個方面：

1. 用于定位各種細胞內成分的免疫酶染色。

2.研究抗酶抗體的合成。

3. 出現少量免疫沉淀。

4、體液中抗原或抗體成分的定量檢測。

二、以下是我公司ELISA產品存在的問題及解決方法

1、加入反應終止液后，無吸光度值或吸光度值偏低。

一個。原因：沒有添加酶標。

解決方法：請按照操作步驟進行。

灣。原因：套件內的物品未全部歸還。

解決方案：在繼續之前，確保試劑盒中的內容物已恢復到溫度。

C。原因：室溫太低。

解決方法：如果室溫過低（<19°C），請在步驟4中適當延長孵育時間。

d。原因：未使用套件的清洗液進行清洗。

解決方案：請使用套件中提供的清潔液進行清潔。

e.原因：套件已過期。

解決方法：請更換還在有效期內的套件。

2、標準曲線線性差或平行度差。

一個。原因：孵化位置沒有很好的避光或氣流干擾。

解決方案：確保孵化位置既不透光也不通風（例如在抽屜內）。

灣。原因：操作時間過長。

解決方法：請熟練后操作。

C。原因：微孔之間相互污染。

解決方法：加樣時注意不要濺出氣孔，以免污染其他氣孔。

d。原因：標準物質或酶標添加量不一致。

解決方案：請使用經過校準的移液器，并確保它與吸頭良好貼合。

e.原因：添加樣品或試劑的操作方法不正確。

解決方案：添加樣品或試劑時，吸頭不應接觸微孔。

F。原因：洗版過程出現問題（如管道堵塞，洗版后未立即進行下一步）。

解決方法：請隨時監控洗板機的洗滌過程，洗完后立即進行下一步。

3.吸光度值都很高（或者線性度不夠陡峭）。

一個。原因：室溫過高（>25℃）。

解決方法：如果室內溫度不能降低，請適當縮短步驟4中的孵育時間。

灣。原因：底物溶液被污染。

解決方法：如果發現底物溶液呈淡藍色，請勿使用。

C。原因：反應時間過長。

解決方法：請控制反應時間。

d。原因：酶標儀污染了盒內其他試劑。

解決方法：用過的吸頭應立即丟棄，以免試劑相互污染。所有與試劑（尤其是酶標記物和底物溶液）接觸過的容器都應立即清洗。 （先用漂白劑浸泡，再用清水沖洗，確保無殘留）

4. 陰性標準的吸光度低于陽性標準。

一個。原因：微孔中的試劑沒有充分混合。

解決方法：加入試劑后，輕敲盤子使其充分混合。

灣。原因：洗版過程有問題（同2-f.）。

解決方法：請參考2-f。

C。原因：加樣量或酶標量不一致。

解決方法：請參考2-d。

該IBL試劑盒可用于小鼠血清、EDTA血漿和細胞上清液中IL-6的定量檢測

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